আণবিক ডায়াগনস্টিক প্রযুক্তিগুলি আজ একটি অভূতপূর্ব গতিতে বিকশিত হচ্ছে, গত দুই বছরে উল্লেখযোগ্য অগ্রগতি রয়েছে। এর মধ্যে, আইসোথার্মাল পরিবর্ধন প্রযুক্তিগুলি বিশেষ সরঞ্জামগুলির প্রয়োজন ছাড়াই পরিবর্ধনের সম্পাদন করার দক্ষতার কারণে আরও মনোযোগ পেয়েছে। বেশ কয়েকটি সুপরিচিত আইসোথার্মাল প্রশস্তকরণ পদ্ধতি বিদ্যমান যেমন ল্যাম্প, আরপিএ এবং আরএএ। যাইহোক, আজ আমি একটি নতুন আইসোথার্মাল পরিবর্ধন প্রযুক্তি-এমআইআরএ চালু করতে চাই।
প্রত্যেকের মূল ধারণাগুলি সম্পর্কে ধারাবাহিক বোঝাপড়া রয়েছে তা নিশ্চিত করার জন্য, এখানে কিছু মেয়াদী ব্যাখ্যা রয়েছে:
- রিকম্বিনেজ পলিমেরেজ পরিবর্ধন (আরপিএ): এটি একটি রিকম্বিনেজ-মধ্যস্থতা পরিবর্ধন প্রযুক্তি।
-রিকম্বিনেজ-এডেড এমপ্লিফিকেশন (আরএ): অনুরূপ রিকম্বিনেজ-মধ্যস্থতা পরিবর্ধন পদ্ধতি।
- লুপ-মধ্যস্থতাযুক্ত আইসোথার্মাল পরিবর্ধন (এলএএমপি): আরেকটি আইসোথার্মাল পরিবর্ধন কৌশল।
- মাল্টিয়েজাইম আইসোথার্মাল র্যাপিড এমপ্লিফিকেশন (এমআইআরএ): একটি নতুন আইসোথার্মাল র্যাপিড এমপ্লিফিকেশন প্রযুক্তি।
দ্রুত সংক্ষিপ্তসার এবং স্পষ্টতা:
অনেকে ভাবতে পারেন যে এই বিভিন্ন আইসোথার্মাল পরিবর্ধনের পদ্ধতিগুলির মধ্যে কোনটি আরও নির্ভরযোগ্য এবং স্থিতিশীল। বাস্তবে, প্রতিটি প্রযুক্তির শক্তি এবং সীমাবদ্ধতা রয়েছে। যাইহোক, সফল গ্রহণের মূল কারণগুলি হ'ল বিভিন্ন অ্যাপ্লিকেশনগুলিতে নির্ভরযোগ্যভাবে, স্বল্প ব্যয় এবং শক্তিশালী পারফরম্যান্স স্কেল করার ক্ষমতা।
আমি এখন যা জানি তার উপর ভিত্তি করে প্রতিটি প্রযুক্তি সংক্ষেপে বিশ্লেষণ করব:
ল্যাম্প (লুপ-মধ্যস্থতাযুক্ত আইসোথার্মাল পরিবর্ধন):
ক্ষেত্রের অনেকেই জানেন যে ল্যাম্পটি জাপানে উদ্ভূত হয়েছিল, ডাঃ নোটোমি 2000 সালে একটি উপন্যাস জিন পরিবর্ধন কৌশল হিসাবে বিকাশ করেছিলেন। বর্তমানে, এই প্রযুক্তির মালিকানা জাপানি সংস্থা আইকেন কেমিক্যাল কোং, লিমিটেডের অন্তর্গত।
সুবিধা:
- উচ্চ সংবেদনশীলতা (traditional তিহ্যবাহী পিসিআর পদ্ধতির চেয়ে বেশি মাত্রার অর্ডার)।
- স্বল্প প্রতিক্রিয়া সময় (প্রতিক্রিয়াগুলি 30-60 মিনিটে সম্পন্ন করা যেতে পারে)।
- ক্লিনিকাল ব্যবহারে বিশেষ যন্ত্রের প্রয়োজন নেই (যদিও কিট বিকাশের সময় একটি রিয়েল-টাইম টার্বিডিমিটার সুপারিশ করা হয়)।
- পরিচালনা করা সহজ (ডিএনএ বা আরএনএ সনাক্ত করা যাই হোক না কেন, প্রক্রিয়াটিতে একটি প্রতিক্রিয়া নলটিতে প্রতিক্রিয়া সমাধান, এনজাইম এবং টেমপ্লেট মিশ্রিত করা জড়িত, তারপরে জল স্নান বা ইনকিউবেটারে 30-60 মিনিটের জন্য প্রায় 63 ডিগ্রিতে সঞ্চারিত করা হয়, ফলাফলগুলি নগ্ন চোখের দ্বারা পর্যবেক্ষণযোগ্য)।
অসুবিধাগুলি:
- টিউবটি খোলার পরে উচ্চ সংবেদনশীলতার ফলে অ্যারোসোল দূষণ হতে পারে, এটি মিথ্যা ধনাত্মকতার উচ্চ ঝুঁকির কারণে পিসিআর পরীক্ষাগারের বাইরে ব্যবহারের জন্য এটি অনুপযুক্ত করে তোলে।
- প্রাইমার ডিজাইন চ্যালেঞ্জিং, এটি কিছু রোগের জন্য অনুপযুক্ত করে তোলে, বিশেষত কয়েকটি সাধারণ ক্রমযুক্ত ভাইরাস দ্বারা সৃষ্ট।
- এর অ্যাপ্লিকেশন তুলনামূলকভাবে সীমাবদ্ধ।
আরপিএ এবং আরএএ আইসোথার্মাল পরিবর্ধন প্রযুক্তি:
এই দুটি পদ্ধতি মূলত সমজাতীয়, মূল পার্থক্যটি ব্যবহৃত রিকম্বিনেজের উত্স হিসাবে ব্যবহৃত হয়।
- আরপিএর রিকম্বিনেজ টি 4 ব্যাকটিরিওফেজ থেকে আসে।
- আরএএর রিকম্বিনেজ ব্যাকটিরিয়া বা ছত্রাক থেকে প্রাপ্ত।
কাজের নীতিমালার মূল বিষয়গুলি:
1। এটিপির উপস্থিতিতে, রিকম্বিনেজ প্রাইমারের সাথে আবদ্ধ হয়, একটি প্রোটিন-নিউক্লিক অ্যাসিড কমপ্লেক্স গঠন করে, যা পরে লক্ষ্য ডিএনএর সাথে মিলে যায়।
2। প্রাইমার একবার ম্যাচিং ডিএনএ টেম্পলেটটি সন্ধান করে, এটিপি হাইড্রোলাইসিস রিকম্বিনেজকে প্রাইমার ছেড়ে যাওয়ার শক্তি সরবরাহ করে এবং ডিএনএ পলিমেরেজ একটি নতুন ডিএনএ স্ট্র্যান্ডকে সংশ্লেষ করে।
3। একই সময়ে, একক-স্ট্র্যান্ডড ডিএনএ-বাইন্ডিং প্রোটিন (এসএসবি) ডাবল-স্ট্র্যান্ডের সংস্কার রোধ করতে বাস্তুচ্যুত ডিএনএ স্ট্র্যান্ডের সাথে আবদ্ধ হয়।
সুবিধা:
- আরপিএ/আরএএ প্রতিক্রিয়া খুব দ্রুত, প্রায় 30 মিনিটের মধ্যে ফলাফল অর্জনযোগ্য।
- সংবেদনশীলতা 10 অনুলিপি/μl পৌঁছাতে পারে।
- প্রশস্তকরণের সময় জটিল সরঞ্জামগুলির প্রয়োজন নেই।
-প্রোব-ভিত্তিক বা কলয়েডাল সোনার ক্রোমাটোগ্রাফি পদ্ধতির আরও বিকাশ ফলাফলের ব্যাখ্যাটিকে ব্যাপকভাবে সহজ করে তোলে, যা এগুলি সম্পদ-সীমাবদ্ধ বা অর্থনৈতিকভাবে সুবিধাবঞ্চিত অঞ্চলে ব্যবহারের জন্য উপযুক্ত উপযুক্ত করে তোলে।
অসুবিধাগুলি:
- আরপিএ হ'ল একটি প্রযুক্তি যা ব্রিটিশ সংস্থা টুইস্টডিএক্স দ্বারা নির্মিত, যা এখন অ্যাবটের মালিকানাধীন, যার ফলে উচ্চ ব্যয়, দীর্ঘ সরবরাহ চক্র এবং প্রযুক্তিগত সহায়তার অভাব হয়। এটি চীনে বৃহত আকারের প্রয়োগ এবং ব্যাপক উত্পাদন কঠিন করে তোলে।
- আরএএ একটি খাঁটি ঘরোয়া প্রযুক্তি, তবে এতে হস্তক্ষেপ প্রতিরোধের এবং পণ্য রিএজেন্ট ধারাবাহিকতার ক্ষেত্রে স্থিতিশীলতার অভাব রয়েছে। তদুপরি, কার্যকরী এনজাইমগুলির জন্য উত্পাদন প্রক্রিয়াটির উন্নতি প্রয়োজন। যদিও প্রযুক্তিটি পাঁচ বছর ধরে বাজারে রয়েছে, স্থিতিশীলতা এবং বহুমুখিতা সমস্যার কারণে এটি এখনও ব্যাপকভাবে গৃহীত হয়নি।
- আরপিএ এবং আরএএ উভয়েরই প্রাইমার প্রয়োজন যা দৈর্ঘ্যে 30-35 বিপি। সংক্ষিপ্ত প্রাইমারগুলি নির্দিষ্টতা, সংবেদনশীলতা এবং প্রশস্তকরণের গতি প্রভাবিত করে, প্রাইমার ডিজাইনকে চ্যালেঞ্জিং করে তোলে।
মীরা (মাল্টিয়েজাইম আইসোথার্মাল র্যাপিড পরিবর্ধন):
মীরা হ'ল একটি উপন্যাস আইসোথার্মাল পরিবর্ধন প্রযুক্তি যা মাঝের -2019 এ প্রবর্তিত} এটি আরপিএ এবং আরএএর সমকামী।
যদিও এমআইআরএ আরপিএ এবং আরএএর সাথে কাজের নীতিগুলির ক্ষেত্রে সাদৃশ্য ভাগ করে নিয়েছে, এনজাইম নির্বাচন, চাষ, পরিশোধন এবং বৃহত আকারের উত্পাদনের অন্যান্য দিকগুলিতে উল্লেখযোগ্য পার্থক্য রয়েছে। তদুপরি, মিরার বিকাশকারী, অ্যাম্পফিউচারের পিছনে প্রযুক্তিগত দল প্রযুক্তিটি নিখুঁত করতে প্রায় 11 বছর ব্যয় করেছে। এটি এখন ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত রিজেন্টস, কাস্টম বিকাশ, গবেষণা প্রকল্প এবং অন্যান্য কাস্টমাইজযোগ্য পরিষেবাদির বিকাশকে সমর্থন করার জন্য পুরোপুরি সজ্জিত।
সুবিধা:
1। মিরা রিএজেন্টগুলিতে কার্যকরী প্রোটিনগুলি বিভিন্ন এনজাইমগুলি থেকে উত্সাহিত হয়, কিছু এনজাইমগুলি মূল এনজাইম সিস্টেমের দক্ষতা বাড়ানোর জন্য লক্ষ্যযুক্ত পরিবর্তনগুলি সহ চলছে, যার ফলে আরও বিস্তৃত সিস্টেম তৈরি হয়।
2। শক্তিশালী হস্তক্ষেপ প্রতিরোধ এবং স্থায়িত্ব। মীরা রিএজেন্টগুলি হিম-শুকনো উত্পাদন প্রক্রিয়াগুলির সাথে কোফ্যাক্টর নির্বাচন এবং ঘনত্বের ক্ষেত্রে বিস্তৃত অপ্টিমাইজেশনের মধ্য দিয়ে যায়, এগুলি হস্তক্ষেপ এবং আরও স্থিতিশীল করার জন্য আরও প্রতিরোধী করে তোলে।
3। কাস্টমাইজেশন এবং বহুমুখিতা। কার্যকরী প্রোটিন উত্পাদন এবং প্রযুক্তির গভীর বোঝার উপর সম্পূর্ণ নিয়ন্ত্রণের কারণে, এমআইআরএ বিভিন্ন অ্যাপ্লিকেশনগুলির সাথে খাপ খাইয়ে নেওয়া যেতে পারে, বিভিন্ন রিএজেন্ট সিস্টেম এবং ব্যক্তিগতকৃত কাস্টমাইজেশন পরিষেবাদি সরবরাহ করে।
4। মালিকানাধীন পেটেন্টস। যেহেতু এমআইআরএ 100% দেশীয়ভাবে বিকশিত, তাই পণ্য বিকাশের সময় পেটেন্ট লঙ্ঘনের ঝুঁকি নেই। এটি মিরাকে দেশীয় এবং আন্তর্জাতিক উভয় বাজারেই একটি প্রতিযোগিতামূলক সুবিধা দেয়।
5 ... একটি সম্পূর্ণ উত্পাদন প্রোটোকল প্রতিষ্ঠিত হয়েছে, যাতে স্থিতিশীল বৃহত আকারের উত্পাদনকে মঞ্জুরি দেয়।
অসুবিধাগুলি:
1। বাজারের স্বীকৃতি এখনও কম, এবং বিস্তৃত গ্রহণযোগ্যতা অর্জনের জন্য বিভিন্ন ক্ষেত্রের আরও ডেটা এবং রেফারেন্স (যেমন বিভিন্ন ক্ষেত্রে ইতিবাচক হার) প্রয়োজন।
2। প্রাইমার ডিজাইন এখনও আরপিএ বা আরএএর বৈশিষ্ট্যগুলি অনুসরণ করে, দীর্ঘতর প্রাইমার বা প্রোব সিকোয়েন্সগুলির প্রয়োজন হয়, যা বর্তমান পিসিআর ব্যবহারকারীদের জন্য দ্রুত স্যুইচকে সহজতর করতে পারে না।