অ্যারোমোনাস হাইড্রোফিলা হল জলজ চাষের একটি উল্লেখযোগ্য প্যাথোজেনিক ব্যাকটেরিয়া, যা খামার করা প্রাণীদের মধ্যে মারাত্মক রোগ সৃষ্টি করে এবং এর ফলে যথেষ্ট অর্থনৈতিক ক্ষতি হয়। সাইটে দ্রুত সনাক্তকরণ সক্ষম করার জন্য, আমরা একটি পোর্টেবল মাইক্রোফ্লুইডিক প্ল্যাটফর্ম তৈরি করেছি যা স্বয়ংক্রিয় তরল পরিচালনার সাথে মাল্টি-এনজাইম আইসোথার্মাল দ্রুত পরিবর্ধন (MIRA) সংহত করে৷ চিপ ডিজাইনে রক্ষণাবেক্ষণের জন্য একটি ক্ষুদ্র কম্পন মোটর এবং সিরামিক হিটিং প্যাড অন্তর্ভুক্ত করা হয়েছে
সুনির্দিষ্ট তাপমাত্রা নিয়ন্ত্রণ এবং নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন এবং পরিবর্ধন জুড়ে প্রতিক্রিয়া একজাতীয়তা নিশ্চিত করুন। একটি ক্ষুদ্রাকৃতির বায়ু পাম্প নির্ভুলতার জন্য একটি একক পাইপটিং ধাপে চিপের মাধ্যমে অপরিশোধিত ডিএনএ নির্যাস চালায়পরিমাপ নিষ্কাশিত ডিএনএ পরবর্তীতে MIRA এর সাথে প্রিলোড করা একটি প্রতিক্রিয়া চেম্বারে স্থানান্তর করা হয়েছিলরিয়েল টাইম ফ্লুরোসেন্স পর্যবেক্ষণের অধীনে 39 ডিগ্রীতে আইসোথার্মাল অ্যামপ্লিফিকেশনের জন্য বিকারক। এই প্ল্যাটফর্ম সনাক্ত করা হয়েছে
উঃ পানির নমুনায় 40 মিনিটের মধ্যে হাইড্রোফিলা, 1 × 10² থেকে 1 × 10⁷ CFU⋅mL পর্যন্ত একটি রৈখিক পরিসর অর্জন করে−1এবং সনাক্তকরণের একটি সীমা (LOD) 10 CFU⋅mL−1. উল্লেখযোগ্যভাবে, এর মডুলার ডিজাইন প্রাইমার এবং প্রোবের সহজ আদান-প্রদানের অনুমতি দেয়, যা প্ল্যাটফর্মটিকে জলজ চাষে বিভিন্ন ব্যাকটেরিয়াল প্যাথোজেন সনাক্ত করার জন্য সহজেই অভিযোজিত করে তোলে।
পোর্টেবল মাইক্রোফ্লুইডিক প্ল্যাটফর্ম এবং A. হাইড্রোফিলার জন্য প্রচলিত সনাক্তকরণ প্ল্যাটফর্মের পরিকল্পিত তুলনা। (ক) বহনযোগ্য মাইক্রোফ্লুইডিক
প্ল্যাটফর্ম এই প্ল্যাটফর্মে সনাক্তকরণ কার্যপ্রবাহ নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন, সুনির্দিষ্ট পাইপটিং, পরিবর্ধন এবং সনাক্তকরণকে একীভূত করে। (খ) প্রচলিত সনাক্তকরণ প্ল্যাটফর্ম। প্রচলিত পরীক্ষাগার-ভিত্তিক কর্মপ্রবাহ অত্যাধুনিক যন্ত্রপাতি, প্রশিক্ষিত কর্মী, এবং সময়-নিবিড় পদ্ধতির উপর নির্ভর করে।
পোর্টেবল মাইক্রোফ্লুইডিক প্ল্যাটফর্মের স্থিতিশীলতা মূল্যায়ন। (ক) পোর্টেবল মাইক্রোফ্লুইডিক প্ল্যাটফর্মের ফটোগ্রাফ। (B, C) নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন এবং সনাক্তকরণ চেম্বারগুলির তাপীয় কর্মক্ষমতা। সিরামিক হিটিং প্যাড এবং চেম্বারের তাপমাত্রার মধ্যে সম্পর্ক। (D) ফ্লুরোসেন্স সনাক্তকরণ স্থায়িত্ব (N=3)। প্রশস্তকরণ প্রক্রিয়া জুড়ে 5 মিনিটের ব্যবধানে ফ্লুরোসেন্সের তীব্রতা পরিমাপ করা হয়েছিল।
পোর্টেবল মাইক্রোফ্লুইডিক প্ল্যাটফর্মের কর্মক্ষমতা মূল্যায়ন। (A) A. হাইড্রোফিলা সনাক্তকরণের জন্য ক্রমাঙ্কন বক্ররেখা (N=3)। 1 × 101 –1 × 108 CFU⋅mL ঘনত্বের পরিসর জুড়ে A. হাইড্রোফিলা সনাক্ত করে একটি ক্রমাঙ্কন বক্ররেখা প্রতিষ্ঠিত হয়েছিল−1সর্বোত্তম অবস্থার অধীনে। (খ) চিপ-থেকে-চিপ প্রজননযোগ্যতা মূল্যায়ন। A. হাইড্রোফিলার জন্য MIRA পরীক্ষা দুটি স্বাধীন ছাঁচের প্রতিটি থেকে তৈরি দশটি চিপগুলিতে সঞ্চালিত হয়েছিল। (C) নির্দিষ্টতা বিশ্লেষণ (N=3)। MIRA পরীক্ষার নির্দিষ্টতা লক্ষ্য A. হাইড্রোফিলা এবং 11টি অ{10}}লক্ষ্যযুক্ত ব্যাকটেরিয়া প্রজাতির বিরুদ্ধে যাচাই করা হয়েছিল৷ (D) qPCR এর সাথে তুলনা (N=3)। প্ল্যাটফর্ম এবং qPCR উভয়ই বিভিন্ন ঘনত্বে A. হাইড্রোফিলা সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। (ঙ) ক্ষেত্রের সনাক্তকরণ-বিচ্ছিন্ন স্ট্রেন (N=3)। প্ল্যাটফর্ম এবং qPCR উভয় ব্যবহার করে A. হাইড্রোফিলার চারটি ক্ষেত্র{19}}বিচ্ছিন্ন স্ট্রেন সনাক্ত করা হয়েছিল৷