এখানে, sCRAM (suboptimal protospacer adjacent motif (PAM)-মিডিয়াটেড CRISPR RNA এবং Cas12a নিউক্লিয়াস মাল্টিএনজাইম আইসোথার্মাল দ্রুত পরিবর্ধনের সাথে মিলিত, একটি দ্রুত এবং নিষ্কাশন-বিনামূল্যে ডায়াগনস্টিক প্ল্যাটফর্ম যা ASFV এর মধ্যে 20 মিনিটের মধ্যে সনাক্ত করে। sCRAM মাল্টিএনজাইম আইসোথার্মাল অ্যামপ্লিফিকেশন (MIRA) এবং একটি সাবঅপ্টিমাল PAM-মধ্যস্থ CRISPR/ এর সমন্বয়ে একটি-টিউব প্রতিক্রিয়ার সাথে একটি দ্রুত নিউক্লিক অ্যাসিড রিলিজ ধাপ (40 ডিগ্রি, 5 মিনিট) সংহত করে
Cas12a সিস্টেম (37 ডিগ্রি , 15 মিনিট), যন্ত্র সক্রিয় করে-UV আলো বা পার্শ্বীয় প্রবাহ স্ট্রিপ (LFS) এর মাধ্যমে বিনামূল্যে ভিজ্যুয়াল রিডআউট। sCRAM একক-কপি শনাক্তকরণ সংবেদনশীলতা প্রদর্শন করে এবং পাঁচটি সাধারণ, পিসিভিপ্যাথ, জেপিভিপিআরএস, জেপিভিপিআরএস, জেপিভিপিআরএস, জেপিভিপিআরএস (পিসিভিপ্যাথ, জেভিপিআরএস) সহ একক-কপি সনাক্তকরণ সংবেদনশীলতা প্রদর্শন করে। পিআরভি)। 111টি সিমুলেটেড এবং ক্লিনিকাল নমুনার (রক্ত, প্লাজমা এবং swabs সহ) মূল্যায়নে UV রিডআউটের জন্য qPCR এর সাথে 100% এবং LFS-এর জন্য 98.20% মিল পাওয়া গেছে।
রিডআউট, উভয় পদ্ধতিই 100% নির্দিষ্টতা প্রদর্শন করে। sCRAM-এর সরলতা, গতি এবং ক্ষেত্রের অভিযোজনযোগ্যতা সীমিত সেটিংসে বিকেন্দ্রীভূত ASFV নজরদারির সম্ভাবনাকে আন্ডারস্কোর করে-, যা প্রাদুর্ভাব নিয়ন্ত্রণের জন্য একটি শক্তিশালী হাতিয়ার প্রদান করে।
এই গবেষণায়, আমরা sCRAM তৈরি করেছি, একটি দ্রুত এবং ক্ষেত্র-নিয়োগযোগ্য ASFV সনাক্তকরণ প্ল্যাটফর্ম যা মাল্টিএনজাইম আইসোথার্মাল অ্যামপ্লিফিকেশন সহ সাবঅপ্টিমাল PAM-মধ্যস্থ CRISPR/Cas12a একীভূত করে৷ অ্যাস 20 মিনিটের মধ্যে একক-কপি 1 কপি/uL সংবেদনশীলতা অর্জন করে এবং প্রধান সোয়াইন প্যাথোজেনগুলির সাথে কোনও ক্রস-প্রতিক্রিয়া দেখায় না। রক্ত, প্লাজমা এবং সোয়াব নমুনা জুড়ে ক্লিনিকাল বৈধতা UV লাইট রিডআউট ব্যবহার করে qPCR-এর সাথে সম্পূর্ণ সঙ্গতি এবং পার্শ্বীয় প্রবাহ স্ট্রিপের মাধ্যমে 98.20% নির্ভুলতা প্রদর্শন করেছে। সরলীকৃত অপারেশন, উচ্চ সংবেদনশীলতা এবং নির্দিষ্টতা, এবং ভিজ্যুয়াল ফলাফলের ব্যাখ্যা সহ, sCRAM সাইটের{11}}এএসএফভি নজরদারি এবং পরিচর্যা ডায়াগনস্টিক অ্যাপ্লিকেশনগুলির-বিস্তৃত বিন্দুর জন্য শক্তিশালী সম্ভাবনা সরবরাহ করে৷
